《生化危机0》的情节解开了系列中的诸多迷题，还让人们更多的了解了威斯克以及威廉·柏肯的背景。在游戏系统方面也加入了不少新要素。异次元箱的设定消失，这一点让一些玩家们有点不大适应，不过也因此带来了一些全新玩法。
另外最明显的特色就是玩家要不断切换控制两位主角才能顺利进行游戏，另外解迷方面也需要两个人的通力配合，而两个人合作作战也带来一些很有趣的作战方法。
另外该作在难度上也是系列最高的，游戏中弹药非常有限，玩家们经常都要辛辛苦苦的将子弹省下来到BOSS战中再用。